Gowok dalam tradisi Jawa adalah profesi perempuan lajang yang bertugas mengajarkan ilmu bercinta kepada calon pengantin laki-laki. Film ini berangkat dari gagasan tersebut dan dikembangkan berdasarkan serat fiktif Atmaprawesa.
Di dalam film, tokoh Nyai Santi (diperankan oleh Lola Amaria) adalah seorang gowok yang telah lama mengabdikan hidupnya untuk melatih para bangsawan muda sebelum menikah. Perannya digambarkan bukan hanya sebagai guru seks, tetapi juga pelindung harmoni rumah tangga.
Konflik utama bermula saat Kamanjaya muda (Devano Danendra), putra bangsawan yang dipersiapkan menikah, dikirim belajar kepada Nyai Santi.
Namun, pertemuannya dengan Ratri muda (Alika Jantinia), anak angkat Nyai Santi, membawa cerita ke arah yang lebih rumit.
Ratri sejatinya tengah dipersiapkan menjadi pewaris ilmu gowok dan harus menjaga keperawanannya hingga akhir hayat. Hubungan keduanya berkembang menjadi cinta terlarang di tengah tuntutan tradisi yang ketat.